Klasična kromatografija stolpca
2. kromatografski stolpec (vrsta vrtenja)
3. kromatografski stolpec (priročnik)
*** ceni
Opis
Tehnične parametre
Klasična kromatografija stolpcaje temeljna tehnika ločevanja, ki se široko uporablja pri kemiji in biokemiji za čiščenje in izoliranje komponent iz mešanic ., deluje na načelu diferencialne razdelitve snovi med stacionarno fazo, pakirano v stolpcu in mobilno fazo, ki teče skozi njo .
The stationary phase, typically a solid adsorbent like silica gel or alumina, is tightly packed into a glass or plastic column. The sample mixture is introduced at the top of the column, followed by the addition of the mobile phase-a solvent or mixture of solvents. As the mobile phase percolates down the column, components of the mixture interact differently with the stationary phase Na podlagi njihovih kemijskih lastnosti, kot so polarnost, velikost in afiniteta za adsorbent .
Spojine z močnejšimi interakcijami s stacionarno fazo se počasneje premikajo skozi stolpec, medtem ko tiste s šibkejšimi interakcijami potujejo hitreje . Ta diferencialna migracija povzroči ločitev mešanice na različne pasove ali ulomke, ki jih je mogoče zbrati posamično .
Vredno je zaradi svoje preprostosti, vsestranskosti in stroškovne učinkovitosti . Primerno je tako za ločitve analitičnih lestvic, za prepoznavanje in količinsko opredelitev komponent, kot tudi pripravljalne ločitve, da pridobijo večje količine prečiščenih snovi ., v mnogih pa še vedno nastavljene možnosti, kot so napredne tehnike. za širok razpon aplikacij .
Parametri
Osnovna načela
|
|
Klasična kromatografija stolpca, znana tudi kot tekočina trdna kromatografija, je tehnika ločevanja topljencev, ki temelji na razliki v porazdelitvi med stacionarno fazo (ponavadi trdni adsorbent) in mobilno fazo (topilo) . osnovno načelo je mogoče povzeti na naslednji način: s pomočjo se loči v raztopino, ki se loči v razgradnjo, ki se uporablja, in se migracijam, ki se uporablja, adsorbing, in se migracijam, ki se uporablja, adsorbin in nato, in se migracijam, ki se uporablja, adsorbing, ki se uporablja, in se migracijam, ki se uporablja, adsorbing, ki se uporablja, in se migracijam, ki se uporablja, adsorbing, ki se pojavlja, in se migracijam, ki se uporablja, adsorbin in takratni pripisuje, in se migracijam, ki se uporablja, in se migracijam, ki se uporablja, adsorbin in nato, ki se uporablja, in se migracijam, ki se uporablja, adsorbin različni koeficienti distribucije med fiksno fazo in mobilno fazo . V stolpni kromatografiji je stacionarna faza običajno sestavljena iz poroznih delcev (na primer silikagela, alumina, aktiviranega ogljika itd. topnih molekul iz stacionarne faze, njegovo izbiro pa je treba določiti glede na polarnost topljene in adsorpcijske značilnosti adsorbenta . V postopku ločevanja se mešanica raztopina vnese v stolpec, ki vsebuje stacionarno fazo . s tokom mobilne faze, komponente se po različnih hitrostih premikajo po stolpcu zaradi različne adsorpcijske zmogljivosti stacionarne faze ., zato se bolj polarni komponenti, ki se polarijo polari, adsorbirajo s stacionarnimi fazi Šibka polarnost zlahka odnese mobilna faza, hitrost premikanja pa je hitrejša . na ta način vsaka komponenta tvori številne barvne pasove na stolpcu, da doseže ločitev . |
Analiza aminokislin
Analiza aminokislin se običajno izvaja z uporabo tekočinske kromatografije, od tegaKlasična kromatografija stolpcaje pogosto uporabljena tehnika . Pri tej metodi se ionska izmenjava smola uporablja kot stacionarna faza za ločevanje aminokislin glede na razliko električnega naboja . aminokisline bo morda treba pretvoriti v bolj zaznavno obliko z derivatizacijo, preden vzorec vstopi v derivatizacijo, ki lahko vpliva na derivacijo, ki jo lahko derivatizacijo, ki se lahko pojavi, in aminokizacije lahko izboljšajo, da se derivatizacija ločitve lahko izboljša, da se derivatizacija ločitve lahko pojavi, da lahko derivatizacija ločitvena derivatizacija {2} derevatizacija {2} derevatizacija lahko izboljša. kromatografski stolpec .
- Priprava vzorca: Vzorec beljakovin je hidroliziran na aminokisline . To je mogoče doseči s kislinsko hidrolizo ali encimsko hidrolizo ., hidrolizirani vzorec mora biti podvržena pravilni predhodni obdelavi, kot je odstranitev beljakovinskih ostankov.
- Derivatizacija: Da bi izboljšali občutljivost za odkrivanje in izbiro analize aminokislin, je pogosto potrebna derivatizacija aminokislin . Obstajata dve vrsti derivacij aminokislin: pred -derivacije pred kolono, ki se pojavljajo v stolpcu . pogosti derivativirani derivativirani derivativirani derivativi Metil klorofluorena (fmoc-ci), fenil izotiocianat (pitc), danssil klorid (dansyl-CI), 2, 4- dinitrofluorobenzen (fdnb) itd. .
- Izbira stolpca: Izberite stolpec, primeren za analizo aminokislin, kot so stolpec za izmenjavo ionov, stolpec C18, stolpec C8 itd. .
- Nastavitev kromatografskih pogojev: nastavite ustrezne kromatografske pogoje, vključno z mobilno fazo, pretokom, gradientnim programom itd.
- Analiza vzorca: Vzorec po hidrolizi in derivatizaciji vbrizgamo v kromatograf za analizo . s primerjavo vrhovnega območja in koncentracije vsake aminokisline v vzorcu na standardni krivulji lahko vsebnost aminokisline v vzorcu kvantitativno analiziramo .
- Obdelava podatkov: Glede na vrhovno območje in podatke o koncentraciji, pridobljenih z analizo, se vsebnost vsake aminokisline v vzorcu izračuna, podatki
V analizi aminokislin je veliko primerov uporabe, spodaj pa je navedenih več posebnih primerov:
- Zaznavanje esencialnih aminokislin: Uporaba lahko zazna vsebnost esencialnih aminokislin, kot so izolevcin, levcin, lizin itd.
- Determination of amino acids in Chinese medicine: In the analysis of Chinese medicine, it is also widely used to determine the content of amino acids in Chinese medicine. For example, when determining the content of paeoniflorin in Wuji Baifeng pills, a column with octadecylsilane bonded silica gel as the filler can be used for analysis, and the column can also be used for the separation and determination of other aminokisline .
- Določitev aminokislin v hrani: Vsebnost aminokislin v hrani je tudi eno od pomembnih področij uporabe ., na primer pri določanju nukleotidov v dojenčkih hrane in mlečnih izdelkov, pet nukleotidov v mlečnem prahu je mogoče izolirati in določiti z uporabo C {{1} t, ki je enakovredna kolumna, ki je enakovredna kolumna, ki je enaka, ali pa je bila enaka stolpca, ki je enakovredna kolumna, ki je enaka, ali je bila enaka stolpca, ki je enakovredna kolumna, ki je bila enaka, ali je bila enaka, enakovredna kolumna, ki je enaka, ali je bila enaka, enaka, ali je bila enaka stolpca, ki je bila enaka, ali je bila enaka stolpca, ki je bila enaka, ali je bila enaka stolpca, ki je bila enaka, enaka, ali je enaka, enakovredna kolumna, ali je bila enaka, enaka, ali je bila enaka stolpca z enakim kolumnom ali kolumni Uporabljajte se tudi za določanje vsebnosti aminokislin v drugih živilih, kar zagotavlja pomembno osnovo za nadzor kakovosti hrane in oceno prehrane .
Pri analizi aminokislin je treba izbrati ustrezne reagente derivatizacije in pogoje derivatizacije za izboljšanje občutljivosti in natančnosti zaznavanja .
Izbira stolpca in nastavitev kromatografskih pogojev pomembno vpliva na učinek ločevanja in jo je treba optimizirati glede na specifične vzorce in analitične potrebe .
V procesu analize je treba biti pozoren na pogoje priprave in skladiščenja vzorcev, da se izognemo vplivu kontaminacije in degradacije vzorca na rezultate analize .
Kaj je izvedeno zdravljenje
Derivatizacija je pomembna tehnika predhodne obdelave v vzorcu vKlasična kromatografija stolpca, katerega cilj je izboljšati učinkovitost zaznavanja in ločitve učinka analitov . Sledi podrobna razlaga postopka izpeljane:
|
► Namen derivacijskega zdravljenja 1) Izboljšana uspešnost zaznavanja: Z uvedbo funkcionalnih skupin, ki jih je enostavno zaznati, analit ustvari močnejši signal na detektorju, kar izboljša občutljivost in natančnost zaznavanja . |
|
|
|
► Vrsta derivacijskega zdravljenja 1) Izpeljava pred stolpcem: |
|
Izpeljava po stolpcu ima prednosti dobre obnovljivosti in manj vpliva na dejavnike, vendar zahteva dodatne instrumente in opremo . 1) Izboljšana občutljivost za odkrivanje: na primer v analizi aminokislin lahko uvedba zlahka zaznavnih funkcionalnih skupin (kot so fluorofore) s predkolobno derivatizacijo poveča signalno trdnost aminokislin na detektorju in s tem izboljša občutljivost detekcije . |
|
Klasična kromatografija stolpca, temeljna tehnika v ločitveni znanosti, se še naprej razvija z napredkom v materialih in metodologiji, kar zagotavlja njegovo pomembnost tako v raziskovalnih kot v industrijskih aplikacijah .
Ena obetavna smer je integracija novih stacionarnih faz . inovacije v materialnih znanostih so privedle do razvoja visokozmogljivih pakiranih materialov z izboljšano selektivnostjo, stabilnostjo in učinkovitostjo . Ti materiali omogočajo boljše ločljivosti in hitrejše ločitve v industriji, kot je farmacetikala, kot je farmacetikala, kot je farmacelacija.
Poleg tega je vse pogosteje kombinirano z naprednimi tehnikami odkrivanja, kot je masna spektrometrija, da bi izboljšali občutljivost in natančnost . Ta hibridizacija omogoča bolj celovito analizo kompleksnih mešanic, ki razširi uporabnost tehnike na poljih, kot so metabolomika in proteomika .
Za zaključek je prihodnost v prilagajanju novim materialom, miniaturizaciji in integraciji z vrhunskimi metodami odkrivanja, kar zagotavlja njegovo nadaljnjo uporabnost v sodobnih znanstvenih in industrijskih pokrajinah .
Priljubljena oznake: Klasična kromatografija v stolpci
Pošlji povpraševanje
